老湿免费体验区-老湿免费-老湿机在线观看-老湿机免费体验-亚洲国产成人久久-亚洲国产成人九九综合

首頁 > 技術文章 > ELISA試劑盒測定法測定抗體

ELISA試劑盒測定法測定抗體

2016-09-05 [1847]

ELISA試劑盒原理
其基本原理可概括為:將特異的抗原-抗體免疫學反應和酶學催化反應相結合,以酶促反應的放大作用來顯示初級免疫學反應。因此,酶免疫技術一般均有兩部分組成,即一次或數次免疫學反應和一次酶促反應。抗原、抗體發生特異結合過程中,設法引入酶結合物,如酶標記的抗抗體,然后加入酶的底物,在酶催化下生成有色產物,反映出被測定抗原或抗體的量。
ELISA試劑盒操作流程:
檢測抗體多用間接型elisa。以純化抗原包被載體,經4℃,以無關蛋白封閉至少2小時以上,加入待測樣品,室溫孵育1小時,洗滌干凈后加酶標抗體,再經室溫孵育、洗滌后,以底物顯色,顯色到一定程度終止反應,在酶標儀上讀結果或以肉眼判斷。
類型:elisa具體方法的類型繁多,試劑的標準化問題還未zui后解決,溫育的時間、溫度、洗滌液的種類及洗滌次數等都是影響測定的因素。但參考以上基本過程,無論怎樣變化,均離不開抗原-抗體反應、酶標抗體的免疫學反應及酶催化作用。
特點:
1、敏感性高,可檢出濃度在ug~mg/ml水平;
2、特異性強;
3、重復性好;
4、快速、簡便、廉價。
實驗條件
固相載體:可作為固相載體的物質很多,如:纖維素、聚丙烯酰胺、聚苯乙烯、聚丙烯、交聯葡聚糖、玻璃、硅橡膠、瓊脂糖凝膠等。可以各種形式出現;試管、微量反應板凹孔、小珠.....。zui常用的是聚苯乙烯制品,其吸附性。固相包被的機制一般不外乎物理吸附和共價交聯,
封閉:以無關蛋白占據載體上未被包被的空隙,常用的封閉液是1%牛血清白蛋白或10%小牛血清。
待測樣品:稀釋度要合適,濃度太大會發生非特異性吸附造成假陽性,過分稀釋會影響抗原-抗體之間的免疫學反應。選擇zui適稀釋度,在實驗體系中取光密度在1.0左右的稀釋度為宜。
酶結合物:使用高質量的酶結合物是elisa成功的關鍵。
ELISA試劑盒注意事項
酶聯免疫技術的試劑標準化問題尚未完*,溫育過程的時間、溫度、洗滌液的種類及洗滌次數都是影響zui后測定的因素。為使實驗得到滿意的結果,在操作過程中應作到
1、每次試驗都必須設陽性和陰性對照。
2、封閉要*。
3、洗滌要測定。

主站蜘蛛池模板: 亚州激情视频在线播放 | 午夜成人在线视频 | 日韩一级视频免费观看 | 日韩不卡一级毛片免费 | 天啪天天天天拍天天碰 | 日本在线视频网 | 色国产精品一区在线观看 | 天堂在线视频网站 | 亚洲国产2017男人a天堂 | 亚洲视频免费在线播放 | 欧美囗交| 午夜啪啪网| 日日爱夜夜爱 | 亚洲aav| 色爱区综合 | 天天躁狠狠躁狠狠躁夜夜躁 | 亚洲国产中文在线 | 青青青草视频 | 欧美一级欧美一级高清 | 亚洲精品播放 | 午夜影院观看 | 午夜神器成在线人成在线人免费 | 天天干天天碰 | 性感美女视频免费网站午夜 | 日本成人激情视频 | 日本五级床片午夜视频 | 色一色在线观看视频网站 | 深夜视频免费在线观看 | 又爽又黄无遮挡高清免费视频 | 日本一道本中文字幕 | 五月激情六月丁香 | 日韩欧美亚洲一区 | 日韩国产免费一区二区三区 | 天天爱天天做天天干 | 日本激情视频 | 伊人久久大香线蕉观看 | 亚洲女人的天堂 | 午夜精品久久久久久久第一页 | 天天爱天天操天天射 | 日本高清视频免费在线观看 | 日本乳色www |