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ELISA試劑盒優(yōu)點的操作過程

2017-12-27 [2267]

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ELISA試劑盒優(yōu)點:
A、特異性高:進行了廣泛的非特異性排查,避免了因為穿插反應和干擾導致的實驗數(shù)據(jù)誤差。 
B、精度高:經(jīng)過加標回收率和線性稀釋實驗,確保樣本值的準確性,度高于同類產(chǎn)品(較低的CV%)。 
C、重復性好:lot-to-lot檢測確保zui小的批間差異。 
D、可靠性強:經(jīng)優(yōu)化的試劑盒組分可有用的阻撓假陽性和假陰性實驗成果。 
E、標準曲線:在確保數(shù)據(jù)的前提下供給較寬的檢測規(guī)模,以滿意需求。 
ELISA試劑盒操作過程:
1. 加規(guī)范品:在酶標包被板上設規(guī)范品孔,順次參加不同濃度的規(guī)范品50ul(主張每個濃度做2個平行孔)
2. 加樣:別離設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品40μl,然后再加樣品親和素10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,悄悄晃動混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30倍濃縮洗刷液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5. 洗刷:當心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗刷液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
6. 加酶:除空白孔外每孔參加酶標試劑50μl。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗刷:操作同5。
9. 顯色:每孔先參加顯色劑A50μl,再參加顯色劑B50μl,悄悄震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 停止:每孔加停止液50μl,停止反響(此時藍色立轉(zhuǎn))。
11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序丈量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加停止液后15分鐘以內(nèi)進行。
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